【学术前沿】STORM成像在肾小球基底膜研究中的应用—力显智能INVIEW研究分享
慢性肾脏疾病影响着世界上10%以上的人口,其中大多数源于肾小球的损伤。肾小球过滤屏障(GFB)是一种能够在血流和尿液之间选择性渗透的复杂结构。 作为GFB组成部分之一的肾小球基底膜(GBM),是肾小球超滤的重要介质,它由内皮细胞和其两侧足细胞分泌的细胞外基质(ECM)蛋白组成。 一旦GFB中的任何组成部分出现损伤或遗传缺陷都将会导致肾小球过滤屏障功能障碍,从而使得尿液中蛋白质含量升高引发肾脏疾病。
慢性肾脏疾病影响着世界上10%以上的人口,其中大多数源于肾小球的损伤。肾小球过滤屏障(GFB)是一种能够在血流和尿液之间选择性渗透的复杂结构。 作为GFB组成部分之一的肾小球基底膜(GBM),是肾小球超滤的重要介质,它由内皮细胞和其两侧足细胞分泌的细胞外基质(ECM)蛋白组成。 一旦GFB中的任何组成部分出现损伤或遗传缺陷都将会导致肾小球过滤屏障功能障碍,从而使得尿液中蛋白质含量升高引发肾脏疾病。
随着技术的进步,远场荧光显微技术在图像分辨率中取得了重大进展,在两个横向维度上实现了20- 30nm的近分子分辨率。然而,三维(3D)纳米分辨率成像仍然是一个挑战。 在这里,作者通过使用光学散光以纳米精度确定单个荧光团的轴向和横向位置来演示3D随机光学重构显微镜 (STORM)。光可切换探针的迭代、随机激活可实现每个探针的高精度3D定位,因此无需扫描样本即可构建3D图像。使用这种方法,作者在横向尺寸上实现了20-30 nm的图像分辨率,在轴向尺寸上实现了 50-60 nm的图像分辨率。这一发展使
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单个细胞内大量的相同结构有助于提高超分辨率图像的定位精度并实现多维重建。使用随机光学重建显微镜 (STORM) 和计算平均,作者估计了 30 多个表位标签的径向和轴向位置,这些表位标签与睫状体 TZ 的七个成分、IFT 粒子的九个成分、BBSome 的三个成分和一个直系同源物融合在一起。 总之,作者生成了一个全面的 3D 模型,分辨率为 15-30 nm,显示了几个 TZ、IFT 和 BBS 蛋白质在这种情况下导致的 IFT 复合体的结构变化和纤毛运输的损伤。
在本研究中,研究者主要借助STORM超分辨率显微镜来研究大肠杆菌表面蛋白,目前在国内,随机光学重建显微镜STORM已成功实现商用,有需要STORM成像技术进行实验研究的专家老师们,请文末填写问卷,即可预约获得 iSTORM 超高分辨率显微成像系统试拍服务~
哺乳动物的DNA复制是在许多复制起点开始的,这些复制起点聚集在整个基因组的数千个复制域(RD)中。然而,目前尚不清楚每个RD内的复制起源是随机激活还是优先在某些染色质特征附近激活。